实时荧光定量PCR(QPCR)是在常规的PCR基础上加入荧光标记探针或相应的荧光染料来实现定量功能，其原理在于随着PCR反应的进行，PCR反应产物不断累计，荧光信号强度也等比例增加，每经过一个循环，收集一个荧光信号强度，从而得到一条荧光扩增曲线图，再对照由已知起始拷贝数的标准品作出的标准曲线即可相对计算出该样品的起始拷贝数。
最初的PCR是通过凝胶电泳、毛细管电泳等方法对产物进行检测，操作繁琐易交叉污染且只能定性分析，为了实现定量分析，简化操作流程，1992年出现了“第二代PCR” 实时荧光定量PCR。
数字PCR技术是当前最精准、最灵敏的基因检测技术，在肿瘤早期筛查及伴随诊断 、无创产前筛查、致病微生物检测等液态活检领域应用广泛。与其他基因检测技术相比，数字PCR检测速度快、操作简便、结果易读、成本低廉，这些优势使其更适用于临床检测，是精准医疗实现平民化、大众化的最佳选择。
1999年，Bert Vogelstein和Kenneth W. Kinzler首次提出了“第三代PCR”数字PCR的概念，其核心思想在于借助微液滴或微腔室，将DNA模板分散在不同的独立反应体系中，实现单个模板扩增，扩增结束后根据各个反应单元荧光信号的有或无进行统计学分析(泊松分布)，从而不依靠标准曲线完成绝对定量。
实时荧光定量PCR(QPCR)是目前市场上最主流的PCR技术，成熟应用于各种分子生物学研究和医学研究之中，但依赖CT值的相对定量方式，灵敏度低等特征限制了其在很多临床领域的应用。
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