链亲和素 产品介绍：

英文名：Streptavidin

别名 ：链酶亲和素;链霉抗生物素蛋白;链霉亲和素
CAS号 ：9013-20-1

规格 ：生物技术级，17u/mg

• 介绍：链亲和素（SA）是阿维丁链霉菌（Streptomyces avidinii）表达的一种小分子蛋白。本制品为127AA 核心结构，每分子SA结合4个生物素分子，国际比活性12~15U/mg。SA与禽类亲和素（Avidin，AV）相比特异性更强，与生物素结合后半衰期长达6h，而AV半衰期仅为1h。由于SA不含糖基且等电点接近中性，因此SA在检测应用中具有比AV更低的非特异性背景。

• 用途：本制品已广泛应用于制备SA-偶联酶制剂（如SA-HRP，SA-AP等），SA-偶联荧光素（即荧光染料，如SA-FITC，SA-Cy2，SA-Cy3等）、SA-偶联磁珠等，进而参与酶联免疫吸附检测（ELISA）、免疫组化、亲和色谱填料、含StrepTagII标签（8-AA寡肽）的蛋白纯化、生物传感器、生物纳米微球、预靶向制药研究、生物芯片被料等生物技术领域。

• 优点：高亲和力，高偶联效率。

• 注意事项：

• 1.冻干粉溶解后应避免反复冻融，建议分装成小包装后分别冻存。

• 2.冻干粉中含20mMNa2CO3 pH9.5的缓冲体系，若用于包被，酶标可以直接使用。若用于胶体金， 调节pH或透析后使用。溶解后立即使用效果 ，不能4℃长期存放。

• 3.若用于ELISA包板，胶体金烘金，硝酸纤维素膜上用SA划线后需要烘干保存，包被液或缓冲液中需加入20%蔗糖作为活性保护剂。

• 【操作步骤简述】

• 一、微孔板包被

• 1、用碳酸钠缓冲溶液（pH 9.6）溶解冻干粉，将浓度稀释成3-10ug/ml（客户可设定梯度进行实验）

• 注意：由于SA等电点是7.4，包被不建议使用中性缓冲液

• 2、用移液器吸取100ul/孔，4℃过夜包被或者37℃包被2h；

• 3、洗涤：倒尽板孔中液体，加200ul洗涤液，静放三分钟，反复三次， 将反应板倒置在吸水纸上，使孔中洗涤液流尽，扣干

• 4、后续进入封闭、洗涤、抗原抗体结合流程

• 若不立即进入下游实验，包被板需要进行烘干保存时。包被前，将包被液中加入20%蔗糖作为活性保护剂。

• 二、SA偶联磁珠

• 2.1 NHS 活化

• 1、充分混匀磁珠后，取100μl PangoBeads COOH 磁珠到1.5 ml 离心管中，置于磁性分离上，待固液分离后去除上清液；

• 2、取200μl MES溶液（25mM，pH 5.0）加入到离心管中，置于磁性分离上，待固液分离后去除上清液。重复该步骤1 次； **3、迅速加入新配制的50μl EDC 溶液和50μl NHS 溶液 （均为50mg/ml， 以上述MES 配制）到装有磁珠的离心管中，漩涡混匀使磁珠充分悬浮，室温下垂直混合30min； **4、反应结束后，加入100μl 上述 MES 溶液洗涤 2 次；（活化状态不宜长时间保存， 建议立即进行偶联）

• 2.2 蛋白偶联

• 1、将离心管置于磁性上，分离去除上清液，加入100μl蛋白溶液（25 mM MES，pH 5.0） 轻柔地混匀；（蛋白浓度在0.1-2.0mg/ml）

• 2、在室温下垂直混合反应2h，或在4℃条件下垂直混合过夜；

• 3、反应结束后将离心管置于磁分离架上，磁性分离去除上清液，加入1ml乙醇胺溶液 （3M，pH9.0）洗涤磁珠 2 次；

• 4、加1ml乙醇胺溶液（3M, pH 9.0）于离心管中，涡旋30s，将离心管置于垂直混合 仪中室温反应1-2h；

• 5、反应结束后，将离心管置于磁力架上，待固液分离后移除上清液，然后加入100μl 纯化水轻柔涡旋 30s，磁吸分离，重复该步骤 1 次；

• 6、加入适量的保存液（可根据需要来确定保存溶液的加入量，以调整偶联配体磁珠的加入适量的保存液（可根据需要来确定保存溶液的加入量，以调整偶联配体磁珠的浓度）保存于4°，如果固定的生物配体稳定，可以在保存溶液中加入0.02%（W/V）叠氮化钠作为抑菌剂。

• 外观： 冻干粉

• 敏感性： 对热敏感,易吸潮

• 储存条件： -20℃

• 用途： Applications for enzyme-labeled (HRP, AP) streptavidin: Enzyme immunoassays (EIA), including enzyme-linked immunsorbent assays (ELISA) with biotinylated antibodies Cell and tissue staining (for light microscopy) Western blotting (WB) and other membra

• 注意：部分产品我司仅能提供部分信息，我司不保证所提供信息的 性，仅供客户参考交流研究之用。

生化试剂的不同级别：

1.特级纯:适用于普通实验室工作，一般情况下符合大部分药典(BP,USP，etc.) 标准；
2.药典级：纯度符合Pharmaco-poeia的标准，如（NF，BP，USP，PH EUR，DAB，DAC，JP，PH法郎）；
3.分析纯：适用于分析、研究和质量质控等；
4.优级纯：这一级等同与大多数制造商的分析级(A.R.)，试剂级(R.G.)；
5.光谱纯：有很高的紫外线通透性，适用于严格格的红外光谱测试；
6.食品/ FCC级：产品符合食品化学法典（FCC）规范和 杂质含量限制；
7.分子生物学级：这类产品保证无酶从而避免了分析过程被-干扰，同时这类产品有足够的透明度使之能用于分子生物学中的检测；
8.荧光级：荧光HPLC级是有梯度的并且是荧光控的，特别适合于用荧光HPLC分析PAH。

生化试剂的技术分类:
1. 生化分离与分析技术
光谱技术已从单一的比色法发展为采用分光光度法、透射比浊法、原子吸收和火焰发射光谱法、分子荧光光谱法。分离技术除了一般的离心和超离心技术外，还有层析技术和电泳技术。层析技术包括薄层层析、凝胶层析、离心交换层析、亲和层析、气相层析、高效液相色谱（HPLC）等等。电泳技术中纸电泳、醋酸纤维膜电泳的应用已明显减少，琼脂糖电泳和聚丙烯酰胺凝胶电泳（PAG）应用增多，目前已有自动电泳仪。
2. 自动分析与酶法分析
近年来我国引进了自动生化分析仪用以监测酶活性，分析的酶范围扩大，测定准确度和精密度提高；同时自动化分析促进了酶法对代谢物测定的研究与应用，许多体内的生化反应被模拟，过去采用强碱、强酸、火焰等比较激烈的化学反应被逐渐取代。离子选择电极的应用日益增多，并作为模块组合参与自动化分析。
3. 免疫化学分析
随着单克隆抗体制备技术的广泛应用，免疫浊度法、酶免疫、荧光免疫、发光免疫等自动化检测技术迅速发展，临床化学、免疫学学科与技术之间的交叉和相互渗透，使越来越多的临床化学检验采用了免疫学技术，如apoA I,apoB等载脂蛋白的测定，脂蛋白（a）测定、磷酸肌酸激酶同工酶（CK-MB）质量测定等等。
4. 分子生物学技术
在除了对蛋白质、代谢物等分子水平的研究外，采用分子生物学技术进行基因诊断，正趋向于成熟。

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