大肠埃希氏菌(大肠杆菌)菌种保藏中心产品简介：

其他编号：A5745(ppCHiA)

菌种名称：大肠埃希氏菌(大肠杆菌)菌种保藏中心

拉丁文名：Escherichia coli

培养温度：25-37℃，详见说明书

用途：科研

大肠埃希氏菌(大肠杆菌)菌种保藏中心产品图片：

xuanya可鉴定未知新种、细菌、放线菌、酵母菌、真菌、食药用菌等。

大肠埃希氏菌(大肠杆菌)菌种保藏中心鉴定方法包括：

（1）形态特征和理化特性鉴定
透射电镜、扫描电镜、光学显微镜等形态观察，培养特征观察；各种生理生化特性

（2）化学分类鉴定
细胞壁化学组分、肽聚糖种类、脂肪酸含量、细胞极性脂、醌组分分析等

（3）分子生物学鉴定
DNA-DNA杂交，（G+C）mol%含量，16S、18S、ITS等序列测定，构建系统进化树。

（4）BioLog碳源自动分析鉴定
可鉴定革兰氏阴性菌、革兰氏阳性菌、厌氧菌、酵母、丝状真菌在内的近2000种微生物。

（5）生物梅里埃（API）微生物鉴定系统

（6）生产菌株遗传稳定性实验
主要通过序列分析及ERIC-PCR、BOX-PCR分型证明菌株的遗传稳定性。

大肠埃希氏菌(大肠杆菌)菌种保藏中心处理方法

斜面或平板：

1． 拿到平板形式提供的菌种后请及时使用，或置4-15度条件下暂存，一般不超过一周，我们随附的空白平板供您应急使用。

2． 若是多次使用，应制做成甘油管，放置在-70℃至-80℃冰箱或液氮中保藏。方法见下。

冻干管：

1． 将安瓿管上部（非样品一端）在酒精灯上先均匀烧灼表面，然后再烧灼上部一侧；

2． 灭菌水棉球点烧灼部位，出现裂纹后（注意安瓿管不要倒置）；用灭菌镊子敲开安瓿管；

3． 加入液体培养基约100μL（注意管壁可能会很烫，可冷却后再加液），打匀取少许接种至适宜培养基。

附：-80℃和液氮保藏方法：

（1） 培养：将菌种接种于合适培养基，培养基用固体或液体均可，对生长较快（如大部分弧菌、希瓦氏菌）和生长较慢的菌株用液体培养基培养比较好。培养时期掌握在对数生长期或对数生长后期。

（2） 收集菌体：液体培养时，离心弃去上清液;以平板或斜面培养时，刮取菌体。

（3） 保护剂：20％甘油（或20％甘油+5％海藻糖保藏效果更好）灭菌。

（4） 分装：将菌体与保护剂混匀，菌体用量不能太少，混匀后看上去要浑浊；分装到若干冻存管。

（5） 降温：及时放冰箱，先放-20℃，1-2小时后转移至-70℃至-80℃。如放入液氮中保藏，须注意样品温度降至-40℃以下再放。

（6） 活化：从冰箱或液氮中取出甘油管后，立即放置在40℃温水中摇晃使冰融化，约需50秒-100秒；吸取适量内容物至适宜培养基培养。

也可从冰箱或液氮中取出后，用低温冰盒保温，牙签刮取少许冰接种至合适培养基，甘油管可再放回原处低温保藏（注意动作要快避免过度升温）。

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